LeapWal 無血清細胞凍存液 PZ110R含多種保護劑成分，一些保護劑，易于穿透細胞，避免細胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細胞，同時另一些保護劑不能穿透細胞，但可以在冰晶形成之前，優(yōu)先結合細胞外的水分子，降低細胞外溶液的電解質(zhì)濃度，減少陽離子進入細胞的數(shù)量，我公司無血清細胞凍存液，為多種保護劑組合，在細胞內(nèi)外進行雙重保護，大大提高了細胞復蘇存活率。
 

　　LeapWal 無血清細胞凍存液 PZ110R細胞復蘇過程：
 

　　(1)提前開啟水浴鍋，溫度調(diào)節(jié)到37度。輕輕的晃動凍存管，注意管內(nèi)凍存細胞的融化情況。當管內(nèi)的冰核還有黃豆大小的時候，取出來，用酒精棉擦拭管體，轉移到超凈工作臺內(nèi)。
 

　　注意：這一步對細胞存活率至關重要。既要盡快融化，以減少融化過程對細胞的損害；又要盡可能減少細胞在較高溫度停留的時間，以減少DMSO對細胞的毒害。切不可將凍存管放在水浴鍋內(nèi)不管。
 

　　(2)將凍存的細胞冷凍管從液氮中取出，迅速置于水浴鍋中融化，盡量1min融化，時間越短，對細胞影響越小。
 

　　(3)打開凍存管管蓋。輕柔的將凍存管內(nèi)的細胞懸液(約1mL)吸取出來，轉移到一個預冷的15mL離心管內(nèi)。緩慢加入10mL細胞培養(yǎng)基(4℃)，邊加邊輕搖混勻，滴加完之后蓋上管蓋，輕輕地上下顛倒混勻。將融化后的含細胞的冷凍保存液迅速析出置于新鮮培養(yǎng)基中充分混勻，(如細胞冷凍保存液為500ul，則加入到5ml新鮮培養(yǎng)基中，如細胞冷凍保存液位1ml，則加入10ml新鮮培養(yǎng)基中。)
 

　　(4)混勻后立即離心，800轉，3min即可，離心結束后棄上清，加入預溫的新鮮培養(yǎng)液。
 

　　(5)混勻后分瓶置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(二氧化碳濃度根據(jù)培養(yǎng)基要求決定，通常為5%)。