LeapWal PolyShooter 轉(zhuǎn)染試劑 P09110的原理時帶正電的DEAE-葡聚糖與核酸帶負(fù)電的磷酸骨架相互作用形成復(fù)合物通過細(xì)胞內(nèi)吞噬作用而使DNA轉(zhuǎn)導(dǎo)進(jìn)入細(xì)胞核。此法只適合瞬時轉(zhuǎn)染實驗，轉(zhuǎn)染效率與DEAE-葡聚糖的濃度以及細(xì)胞與DNA/EDAE-葡聚糖混合液接觸時間的長短有關(guān)，可采用較高濃度的DEAE-葡聚糖（1g/L）作用較短時間（0.5-1.5h），也可用較低濃度（250mg/L）的DEAE-葡聚糖坐擁較長時間（8h）。
 

　　脂質(zhì)體是由脂質(zhì)雙分子層組成的、內(nèi)部為水相的封閉囊泡結(jié)構(gòu)。脂質(zhì)體的水相可以包裹多種物質(zhì)。DNA與脂質(zhì)體混合后可被包裹在脂質(zhì)體的水相中。當(dāng)脂質(zhì)體與轉(zhuǎn)染的細(xì)胞的細(xì)胞膜接觸時。其脂質(zhì)雙分子層與細(xì)胞膜融合，脂質(zhì)體水相中的DNA進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，細(xì)胞被轉(zhuǎn)染。
 

　　LeapWal PolyShooter 轉(zhuǎn)染試劑 P09110 轉(zhuǎn)染步驟：

　　1.轉(zhuǎn)染前一天，胰酶消化細(xì)胞并計數(shù)，細(xì)胞鋪板，使其在轉(zhuǎn)染日密度為90-95%。細(xì)胞鋪板在2ml含血清，不含抗生素的正常生長的培養(yǎng)基中。

　　2.對于每孔細(xì)胞，使用250ul無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEMI培養(yǎng)基）稀釋4.0ugDNA輕輕混勻。

　　3.使用前將PolyShooterP09110轉(zhuǎn)染試劑輕輕混勻，用250ul無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEMI 培養(yǎng)基）稀釋10ulPolyShooterP09110轉(zhuǎn)染試劑，輕輕混勻。PolyShooterP09110稀釋后，在5分鐘內(nèi)同稀釋的DNA昆合（<30分鐘）。NOTE 若使用DME培養(yǎng)基，貝U需在5分鐘內(nèi)同稀釋的DNA昆合。

　　4.混合稀釋的DNA（第二步）和稀釋的PolyShooterP09110（第三步）。室溫放置20分鐘。

　　5.（optional）將6孔板中的舊營養(yǎng)液吸出，用無血清培養(yǎng)基清洗兩次。加入2ml無血清配養(yǎng)基。